现在位置是:首 页 >> 
关键字:
双调蛋白对小鼠损伤肺组织的修复作用及机制研究
The study effect and mechanism of amphiregulin on lung reparative phase in ARDS mice
作者:田书宁,蒙臣,罗向红,王贤裕    发布日期:2022-01-11    

目的 探讨双调蛋白(amphiregulin, Areg)对急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)小鼠损伤肺组织的修复作用及机制。方法 使用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)气管滴注制作小鼠ARDS 模型,连续7 d 提取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)。将成年雄性C57BL/6 小鼠用随机数字法分为5 组(n=4/ 组):①空白组;② Areg 组(腹 腔注射重组Areg 蛋白);③ LPS+PBS 组;④ LPS+Areg 组;⑤ LPS+Anti-Areg 组(③④⑤组小鼠 气管滴注LPS,30 min 后腹腔注射PBS、重组Areg 或Areg 中和抗体)。于ARDS 后1、3、5、7 d 提取肺组织与BALF,HE 染色评估肺组织病理变化,BCA 法检测BALF 中总蛋白含量,ELISA 法 检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)与免疫球蛋白M(IgM) 浓度,Western Blot 检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)、增殖细胞核 抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、表面活性蛋白-C(surface proteins-C, SP-C)的表 达情况,免疫荧光检测肺组织PCNA 与SP-C 共表达情况。符合正态分布的计量资料多组间比较采 用方差分析,两组间比较采用LSD-t 检验。结果 与建模前相比[(51.05±2.47) pg/mL],ARDS 后小鼠肺组织中的Areg 含量在第1 天[(71.97±6.51) pg/mL,P<0.01] 与第3 天[(147.58±7.56) pg/mL,P<0.01] 显著升高。在ARDS 后第1 天,LPS+PBS 组和LPS+Areg 组出现明显肺组织间质 水肿、中性粒细胞浸润和肺泡结构塌陷,且损伤程度无明显差异。在第3、5、7 天,与LPS+PBS 组相比,LPS+Areg 组的肺组织病理损伤情况均有明显好转,而LPS+Anti-Areg 组的损伤情况却更 为严重。与空白组相比,LPS+PBS 组小鼠BALF 中总蛋白、IgM、中性粒细胞数量、TNF-α、IL- 1β、IL-6 均有明显升高,Areg 处理显著降低了这些指标的水平。LPS+Areg 组PCNA(1.34±0.10)、 SP-C(1.48±0.10)、p-EGFR(0.92±0.032)的表达水平较LPS+PBS 组[(0.88±0.03),(1.06±0.15), (0.68±0.03),P<0.05] 上调,且LPS+Areg 组PCNA 及SP-C 双阳性细胞较LPS+PBS 组明显增多, 而LPS+Anti-Areg 组则有所下降。结论 Areg 可以通过激活EGFR 通路增加肺泡Ⅱ型上皮细胞的 增殖,从而促进ARDS 损伤肺组织的修复。

田书宁,蒙臣,罗向红,王贤裕. 双调蛋白对小鼠损伤肺组织的修复作用及机制研究[J]. 中华急诊医学杂志, 2022,31(1): 47-54.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2022.01.010

基金项目:国家重点研发项目(2018YFC2001903);国家自然科学基金(81700082);湖北省自然科学基金项目(2017CFB387)

关键词: 急性呼吸窘迫综合征 细菌脂多糖 双调蛋白 表皮生长因子 肺损伤修复