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目的 探讨传统中药光甘草定对脓毒症肺损伤中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)形成及细胞焦亡影响。方法:将24只雄性Wistar大鼠,按照随机数字表法分为3组:脓毒症组采用盲肠结扎穿孔术(cecalligation and puncture, CLP)建立脓毒症大鼠模型;光甘草定组(CLP+GLA)行CLP及光甘草定灌胃(30mg/Kg);对照组(Ctrl)行盲肠探查术,仅进行盲肠翻动后关腹。12小时后留取血浆、肺泡灌洗液及肺组织标本检测。测定肺泡灌洗液蛋白含量;测定肺组织湿重/干重(W/D)比值;用苏木精 - 伊红(HE)染色后观察肺组织病理学改变;用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血浆中NETs标志物MPO-DNA复合物水平 、焦亡相关炎症因子 IL-18、IL-1β的表达水平;Western blot 技术检测大鼠肺组织Caspase-1及Cleaved-caspase-1焦亡蛋白的变化。结果:脓毒症组肺泡灌洗液总蛋白浓度较对照组明显升高(p<0. 01),光甘草定组肺泡灌洗液总蛋白浓度较脓毒症组下降(p<0. 05)。脓毒症组肺水肿程度明显加重,光甘草定组较脓毒症组肺水肿减轻。光镜下观察肺组织病理结果显示:对照组小鼠肺组织结构正常,肺泡清晰;脓毒症组肺泡壁广泛增厚,炎性细胞明显浸润;光甘草定组较脓毒症组肺组织损伤明显减轻。ELISA显示:脓毒症组血浆中NETs标志物MPO-DNA复合物水平和炎症因子IL-18、 IL-1β含量较对照组明显升高(P<0. 001),光甘草定组NETs标志物MPO-DNA复合物水平和炎症因子IL-18、 IL-1β炎症因子表达水平较脓毒症组均显著降低{MPO-DNA:P<0. 01;IL-18、 IL-1β:P<0. 05}。Western blot技术结果显示:与对照组大鼠相比,脓毒症组大鼠肺组织中Caspase-1及Cleaved-caspase-1蛋白阳性信号表达增强;光甘草定组肺组织Caspase-1阳性细胞分布与对照组相似,Cleaved-caspase-1阳性信号表达高于对照组。结论:光甘草定通过抑制NETs生成及细胞焦亡,有效减轻肺部炎症,发挥对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用。
杨铃清,王敏,王雷,马辰东,李增亮,张利鹏. 光甘草定调控NETs抑制细胞焦亡缓解脓毒症肺损伤机制[J]. 中华急诊医学杂志, 2024,33(2): 179-185.