现在位置是:首 页 >> 
关键字:
高迁移率族蛋白B1在脂多糖诱导的Caco-2细胞上皮屏障损伤中的作用
The role of HMGB1 in the injury of Caco-2 epithelial barrier induced by LPS
作者:陈晓雷,陈思如,修光辉,陈献忠,孙洁,凌斌,刘萍    发布日期:2021-02-17    

目的  探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的Caco-2细胞肠上皮屏障损伤中的作用及机制。方法 用Transwell小室培养Caco-2细胞,检测跨上皮电阻值(TEER值),当TEER值达到500Ω•cm2时,单层上皮屏障模型建立成功,将其分为对照组,LPS组,LPS+丙酮酸乙酯(ethylpyruvate,EP)组,LPS和EP的处理浓度分别为100μg/mL、50μg/mL,分别于处理后12、24、48、72h用电阻仪测量各组TEER值;24h时用酶标仪检测FITC-右旋糖酐通透率。将细胞接种于6孔板,融合达到80%时给予以上分组及处理,24h后用蛋白印迹法(WesternBlot)检测各组细胞Occludin蛋白、HMGB1、核转录因子(NF-κB)蛋白表达水平;实时聚合酶链式反应技术检测各组细胞Occludin、HMGB1、NF-κB mRNA表达情况。应用SPSS21.0软件进行统计分析。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 与对照组相比,LPS组12、24、48、72h TEER值(Ω•cm2)明显减少[(514.22±12.59) vs (304.96±9.69),(521.65±13.35) vs (276.21±7.82),(523.99±8.18) vs (206.64±15.85),(491.21±6.72) vs (156.33±10.83),均P<0.05],24h时FITC-右旋糖酐通透率明显增加[(2.58±0.07) vs (1.04±0.06),P<0.05],Occludin蛋白及mRNA表达减少(均P<0.05),HMGB1、NF-κB蛋白及mRNA表达明显增加(均P<0.05);与LPS组比较,LPS+EP组12、24、48、72hTEER值(Ω•cm2)增加[(519.00±5.66) vs (304.96±9.69),(504.69±8.57) vs (276.21±7.82),(453.65±10.74) vs (206.64±15.85),(385.28±7.57) vs (156.33±10.83),均P<0.05],24h时FITC-右旋糖酐通透率明显减少[(1.23±0.11) vs (2.58±0.07),P<0.05],Occludin蛋白及mRNA表达明显增加(均P<0.05),HMGB1、NF-κB蛋白及mRNA表达减少(均P<0.05)。结论 LPS引起肠上皮通透性升高,减少细胞间紧密连接蛋白的表达,其机制可能与HMGB1及下游NF-κB蛋白表达增加有关。

陈晓雷,陈思如,修光辉,陈献忠,孙洁,凌斌,刘萍. 高迁移率族蛋白B1在脂多糖诱导的Caco-2细胞上皮屏障损伤中的作用[J]. 中华急诊医学杂志, 2021,30(3): 287-292.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2021.03.006

基金项目:国家自然科学基金(81901950);云南省科技厅 - 昆明医科大学联合专项基金 [2019FE001(-009),202001AY070001-166];云南省基础研究计划项目(2019FB099)

关键词: 脓毒症 肠上皮屏障功能 高迁移率族蛋白B1 NF-κB蛋白 脂多糖 Caco-2细胞



  • 引证文献(引用了本文的文献)
  • 1) 王孟丽. 低表达HMGB1对宫颈癌干性基因及细胞增殖的影响[J]. 中国优生与遗传杂志,2021,29,8:1042-1045
  • 2) 赵瑾. 高迁移率族蛋白B1过表达对子宫内膜癌细胞增殖、周期和凋亡的影响及机制研究[J]. 陕西医学杂志,2022,51,5:539-542
  • 3) 林川. 葛根芩连汤抑制TNF-α诱导的Caco-2细胞氧化损伤配伍规律研究[J]. 中草药,2022,53,20:6492-6499
  •