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Roles of activating cannabinoid receptor 2 in inhibiting lipopolysaccharide-induced secretion of inflammatory cytokines in RAW264.7 macrophages and its mechanisms
作者：袁清红,刘安鹏,刘强胜,郑菲,张宗泽,王焱林,詹佳 发布日期：2019-07-31
【摘要】目的 探讨激活大麻素2型受体(Cannabinoid receptor 2，CB2R)在抑制脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症因子分泌中的作用及机制。方法 将巨噬细胞 以1×105/ml的密度接种于6孔培养板(2ml/孔)，采用随机数字表法将其分为4组（n=6）：对照组（C组）、LPS组（LPS组）、LPS+CB2R激动剂HU308组(LPS+HU308组)、LPS+CB2R激动剂HU308组+3-甲基腺苷组(LPS+HU308+3-MA组)。LPS组、LPS+HU308组和LPS+HU308+3-MA组加入终浓度为1ug/ml的LPS，孵育15min时，LPS+HU308+3-MA组加入终浓度为10mM的3-MA，继续孵育15min，LPS+HU308组和LPS+HU308+3-MA组加入终浓度为10µM的HU308孵育24h。采用ELISA法检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-1β和IL-18的浓度；采用RT-PCR法检测ICAM-1和NLRP3 mRNA的表达水平，采用western blot 法检测LC3和Beclin1的表达水平，并计算LC3-II/LC3-I比值。结果 与C组比较，LPS组TNF-α、IL-1β和IL-18的浓度升高(P<0.05)，ICAM-1和NLRP3 mRNA表达升高(P<0.05)，LC3-II/LC3-I比值和Beclin1表达上调(P<0.05)；与LPS组比较，LPS+HU308组TNF-α、IL-1β和IL-18的浓度降低(P<0.05)，ICAM-1和NLRP3 mRNA表达降低(P<0.05)，LC3-II/LC3-I比值和Beclin1表达上调(P<0.05)；与LPS+HU308组比较，LPS+HU308+3-MA组TNF-α、IL-1β和IL-18的浓度升高(P<0.05)，ICAM-1和NLRP3 mRNA表达升高(P<0.05)，LC3-II/LC3-I比值和Beclin1表达下调(P<0.05)。结论 激活大麻素2型受体可抑制脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症因子分泌，其作用机制可能与增强自噬有关。
袁清红,刘安鹏,刘强胜,郑菲,张宗泽,王焱林,詹佳. 激活大麻素2型受体在抑制脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症因子分泌中的作用及机制研究[J]. 中华急诊医学杂志, ,: 978-982.DOI号:
基金项目：国家自然科学基金青年基金项目（81101408）；武汉市科技局晨光计划项目（2016070204010150）
关键词： 大麻素2型受体 LPS 炎症因子 巨噬细胞 自噬
